Иммуно-гистохимический анализ содержания коллагена-I и коллагена-III в тканях клапанов сердца при различных формах инфекционного эндокардита: роль фонового состояния или влияние инфекции?
Иммуно-гистохимический анализ содержания коллагена-I и коллагена-III в тканях клапанов сердца при различных формах инфекционного эндокардита: роль фонового состояния или влияние инфекции?
Организация: 1 ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, ул. Студенческая, 10, г. Воронеж, 394036, Российская Федерация; 2 БУЗ ВО «Воронежская областная клиническая больница No 1», Московский пр-т, 151, г. Воронеж, 394066, Российская Федерация; 3 БУЗ ВО «Воронежское областное патологоанатомическое бюро», Московский пр-т, 151, г. Воронеж, 394066, Российская Федерация
Для корреспонденции:
Сведения доступны для зарегистрированных пользователей.
Для цитирования:
Грязнов Д.В., Ковалев С.А., Жданов А.И., Воронцова З.А., Лавренов А.Л., Першин Е.В., Золотарева С.Н., Киншов А.Н., Некрасова Н.В. Иммуногистохимический анализ содержания коллагена-I и коллагена-III в тканях клапанов сердца при различных формах инфекционного эндокардита: роль фонового состояния или влияние инфекции? Креативная кардиология. 2018; 12 (2): 100–19. DOI: 10.24022/1997-3187-2018-12-2-100-119
Поступила / Принята к печати:14.05.201 / 21.05.2018
Введение. Коллагеновые волокна I и III типов являются основным компонентом внеклеточного матрикса клапанного аппарата сердца. Цель исследования – изучение влияния различных форм инфекционного эндокардита (ИЭ) на экспрессию этих белков в тканях сердечных клапанов человека.
Материал и методы. Данные 60 хирургических пациентов с ИЭ сравнены с показателями 28 хирургических пациентов с неинфекционным поражением клапанов. Иммуногистохимическое исследованиетканей клапанов сердца проводили с использованием сывороток, содержащих антитела к коллагену-I (K-I) и коллагену-III (K-III). Содержание белка оценивали посредством обработки показателей оптической плотности окраски.
Результаты. При сравнении общей группы с ИЭ и контрольной группы различий в содержании K-I не обнаружено, в то же время при ИЭ получен существенно более низкий уровень K-III. В подгруппе с острым ИЭ выявлено значимое снижение экспрессии как K-I, так и K-III. При подостром эндокардите отмечено повышение уровня K-I и снижение уровня K-III в сравнении с контрольной группой (p<0,0001 во всех вышеуказанных сравнениях). Наименьший уровень как K-I, так и K-III отмечен в двух подгруппах контрольной группы: в препаратах с кальцинированным аортальным стенозом (КАС) (pK-I=0,003; pK-III=0,019), а также образцах трехстворчатых клапанов (ТК); (pK-I<0,0001; pK-III<0,0001). Низкий уровень содержания обоих белков имел место также при вторичном эндокардите на фоне КАС (pK-I<0,0001; pK-III<0,0001), уменьшение экспрессии K-III обнаружено в инфекционном поражении ТК (p<0,0001). При пролапсе митрального клапана (ПМК) и при ИЭ на фоне ПМК имело место снижение уровня K-III (p=0,04 и 0,024 соответственно).
Выводы. Основным отличительным признаком ИЭ явилось снижение уровня K-III. На распределение K-I и K-III при ИЭ оказывают влияние: локализация клапанного поражения, фоновая патология сердца, форма, активность и стадия инфекционного процесса.
Литература
Habib G., Lancellotti P., Antunes M.J., Bongiorni M.G., Casalta J.P., Del Zotti F. et al. 2015 ESC Guidelines for the management of infective endocarditis: The task force for the management of infective endocarditis of the European Society of Cardiology (ESC). Endorsed by: European Association for Cardio-Thoracic Surgery (EACTS), the European Association of Nuclear Medicine (EANM). Eur. Heart J. 2015; 36 (44): 3075–128. DOI: 10.1093/eurheartj/ehv319
Millar B.C., Habib G., Moore J.E. New diagnostic approaches in infective endocarditis. Heart. 2016; 102 (10): 796–807. DOI: 10.1136/heartjnl-2014-307021.
Nishimura R.A., Otto C.M., Bonow R.O., Mack M.J., Carabello B.A., McLeod C.J. et al. 2017 AHA/ACC Focused Update of the 2014 AHA/ACC Guideline for the Management of Patients With Valvular Heart Disease: A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Clinical Practice Guidelines. Circulation. 2017; 135 (22). DOI: 10.1161/CIR.0000000000000503.
Тюрин В.П. Инфекционные эндокардиты: Руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2012. / Tyurin V.P. Infective endocarditis: Guidelines. Moscow: GEOTAR–Media; 2012 (in Russ.).
Шевченко Ю.Л. Хирургическое лечение инфекционного эндокардита и основы гнойно-септической кардиохирургии. М.: Династия; 2015. / Shevchenko Yu.L. Surgical treatment of infective endocarditis and basics of pyoseptic cardiac surgery. Moscow: Dinastiya; 2015 (in Russ).
Lepidi H., Durack D.T., Raoult D. Diagnostic methods current best practices and guidelines for histologic evaluation in infective endocarditis. Infect. Dis. Clin. North Am. 2002; 16 (2): 339–61. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12092476 (дата обращения 20.01.2018).
El Accaoui R.N., Gould S.T., Hajj G.P., Chu Y., Davis M.K., Kraft D.C. et al. Aortic valve sclerosis in mice deficient in endothelial nitric oxide synthase. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2014; 306 (9): H1302–13. DOI: 10.1152/ajpheart.00392.2013.
Nomura R., Otsugu M., Naka S., Teramoto N., Matsumoto-Nakano A.M., Ooshima T. et al. Contribution of the interaction of streptococcus mutans serotype k strains with fibrinogen to the pathogenicity of infective endocarditis. Infect. Immun. 2014; 82 (12): 5223–34. DOI: 10.1128/IAI.02164-14.
Pepe G., Nistri S., Giusti B., Sticchi E., Attanasio M., Porciani C. Identification of fibrillin 1 gene mutations in patients with bicuspid aortic valve (BAV) without Marfan syndrome. BMC Med. Gen. 2014; 15: 23. DOI: 10.1186/1471-2350-15-23.
Nallapareddy S.R., Singh K.V., Murray B.E. Contribution of the collagen adhesin Acm to pathogenesis of Enterococcus faecium in experimental endocarditis. Infect. Immun. 2008; 76 (9): 4120–28. DOI: 10.1128/IAI.00376-08.
Gava E., de Castro C.H., Ferreira A.J., Colleta H., Melo M.B., Alenina N. et al. Angiotensin-(1-7) receptor Mas is an essential modulator of extracellular matrix protein expression in the heart. Regul. Pept. 2012; 175: 30–42. DOI: 10.1016/j.regpep.2012.01.001
Nus M., MacGrogan D., Martínez-Poveda B., Benito Y., Casanova J.C. Diet-Induced aortic valve disease in mice haploinsufficient for the notch pathway effector RBPJK/CSL. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2011; 31: 1580–88. DOI: 10.1161/ATVBAHA.111.227561.
Petrov G., Regitz-Zagrosek V., Lehmkuhl E., Krabatsch T., Dunkel A., Dandel M. et al. Regression of myocardial hypertrophy after aortic valve replacement, faster in women? Circulation. 2010; S23–8. DOI: 10.1161/CIRCULATIONAHA.109.927764.
Гасанов А.Г., Бершова Т.В. Роль изменений внеклеточного матрикса при возникновении сердечно-сосудистых заболеваний. Биомедицинская химия. 2009: 55 (2): 155–68. https://elibrary.ru/item.asp?id=12590537 (дата обращения 18.02.2018). / Gasanov A.G., Bershova T.V. The role of extracellular matrix changes in occurrence of cardiovascular diseases. Biomeditsinskaya Khimiya. 2009; 55 (2): 155–68 (in Russ). Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=12590537 (accessed February 18, 2018).
Fleischer K.J., Nousari H.C., Anhalt G.J., Stone C.D., Laschinger J.C. Immunohistochemical abnormalities of fibrillin in cardiovascular tissues in Marfan's syndrome. Ann. Thorac. Surg. 1997; 63 (4): 1012–17. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9124898 (дата обращения 27.02.2017).
LiX.,QiY.,LiY.,ZhangS.,GuoS.,ChuS.etal. Impact of mineralocorticoid receptor antagonists on changes in cardiac structure and function of left ventricular dysfunction. A meta-analysis of randomized controlled trials. Circ. Heart Fail. 2013; 6: 156–65. DOI: 10.1161/CIRCHEARTFAILURE.112.000074.
Земцовский Э.В., Малев Э.Г., Реева С.В., Лу- нева Е.Б., Парфенова Н.Н., Лобанов М.Ю. и др. Диагностика наследственных нарушений соединительной ткани. Итоги и перспективы. Российский кардиологический журнал. 2013; 4: 38–43. DOI: 10.15829/1560-4071-2013-4-38-43. / Zemtsovskiy E.V., Malev E.G., Reeva S.V., Lune- va E.B., Parfenova N.N., Lobanov M.Yu. et al. Diagnosis of genetical abnormalities of connective tissue. Overall results and prospects. Russian Journal of Cardiology. 2013; 4: 38–43 (in Russ.). DOI: 10.15829/1560-4071-2013-4-38-43.
Banerjee T., Mukherjee S., Ghosh S., Biswas M., Dutta S., Pattari S. et al. Clinical significance of markers of collagen metabolism in rheumatic mitral valve disease. PLoS One. 2014; 9 (3): e90527. DOI: 10.1371/journal.pone.0090527.
Votteler M., Berrio D.A., Horke A., Sabatier L., Reinhardt D.P., Nsair A. et al. Elastogenesis at the onset of human cardiac valve development. Development. 2013; 140 (11): 2345–53. DOI: 10.1242/dev.093500.
Leopold J.A. Cellular mechanisms of aortic valve calcification. Circ. Cardiovasc. Interv. 2012; 5 (4): 605–14. DOI: 10.1161/CIRCINTERVENTIONS.112.971028.
Nataatmadja M., West M., West J., Summers K., Walker P., Nagata M. et al. Abnormal extracellular matrix protein transport associated with increased apoptosis of vascular smooth muscle cells in Marfan syndrome and bicuspid aortic valve tho- racic aortic aneurysm. Circulation. 2003; II329–34. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12970255 (дата обращения 03.12.2018).
Sádaba J.R., Martínez-Martínez E., Arrieta V., Álvarez V., Fernández-Celis A., Ibarrola J. et al. Role for Galectin-3 in calcific aortic valve stenosis. J. Am. Heart Assoc. 2016; 5 (11): e004360. DOI: 10.1161/JAHA.116.004360.
Tsamis A., Krawiec J.T., Vorp D.A. Elastin and col- lagen fibre microstructure of the human aorta in ageing and disease: a review. J. R. Soc. Interface. 2012; 10: 1004. DOI: 10.1098/rsif.2012.1004.
Balachandran K., Bakay M.A., Connolly J.M., Zhang X., Yoganathan A.P., Levy R.J. Aortic valve cyclic stretch causes increased remodeling activity and enhanced serotonin receptor responsiveness. Ann. Thorac. Surg. 2011; 92 (1): 147–53. DOI: 10.1016/j.athoracsur.2011.03.084.
Stephens E.H., Nguyen T.C., Itoh A., Ingels N.B., Jr., Miller C., Grande-Allen K.J. The effects of mitral regurgitation alone are sufficient for leaflet remod- eling. Circulation. 2008; 118 (14): S243–9. DOI: 10.1161/CIRCULATIONAHA.
De Buyzere M.L., De Scheerder I.K., Delanghe J.R., Robbrecht J.H., Clement D.L., Wieme R.J. Measurement of autoimmune response against collagen types I, III, and IV by enzyme-linked immunosorbent assay, and its application in infective endocarditis. Clin. Chem. 1989; 35 (2): 246–50. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2914369 (дата обращения 25.12.2017).
Dougherty G. Digital image processing for medical applications. California State University, Channel Islands. Cambridge University Press; 2009.
Qiu J.S.G., Ilyas M., Dolman G. A Semi-automat- ic image analysis tool for biomarker detection in immunohistochemistry analysis. International Conference on Image and Graphics (ICIG). 2013; 937–42. DOI: 10.1109/ICIG.2013.197.
Chen J.-H., Simmons C.A., Towler D.A. Cellmatrix interactions in the pathobiology of calcific aortic valve disease. Critical roles for matricellular, matricrine, and matrixmechanics cues. Circ. Res. 2011; 108: 1510–24. DOI: 10.1161/CIRCRESAHA.110.234237.
Dupuis L., Osinska H., Weinstein M.B., Hinton R.B., Christine B. Insufficient versican cleavage and SMAD2 phosphorylation results in bicuspid aortic and pulmonary valves. J. Mol. Cell. Cardiol. 2013; 60: 50–9. DOI: 10.1016/j.yjmcc.2013.03.010.
Об авторах
Грязнов Дмитрий Владимирович, канд. мед. наук, доцент кафедры госпитальной хирургии ВГМУ
им. Н.Н. Бурденко, сердечно-сосудистый хирург кардиохирургического отделения No 1 ВОКБ No 1, orcid.org/0000-0003-0108-5897
Ковалев Сергей Алексеевич, доктор мед. наук, профессор, главный сердечно-сосудистый хирург Центрального федерального округа, руководитель Воронежского кардиохирургического центра, заведующий кардиохирургическим отделением No 2 ВОКБ No 1, профессор кафедры госпитальной хирургии ВГМУ им. Н.Н. Бурденко,
orcid.org/0000-0001-8200-0351
Академик РАН и РАМН Лео Антонович БОКЕРИЯ,
президент им. А.Н. Бакулева,
главный редактор издательства Центра
Кардиохирург, ученый, педагог и организатор науки, доктор медицинских наук (1973 г.), профессор (1982 г.), академик РАМН (1994 г.), академик РАН (2011 г.), заслуженный деятель науки РФ (1994 г.), лауреат Ленинской премии (1976 г.), Государственной премии СССР (1986 г.), Государственной премии РФ (2002 г.), Премии Правительства РФ (2003 г.).
В 1994 г. Л.А. Бокерия избран по конкурсу на должность директора им. А.Н. Бакулева. В 1998 г. одновременно становится директором Центра хирургической и интервенционной аритмологии МЗ РФ.
С 1994 г. является заведующим кафедрой сердечно-сосудистой хирургии Российской медицинской академии последипломного образования (РМАПО) МЗ РФ. С 1995 г. заведует созданной им кафедрой сердечно-сосудистой хирургии № 2 Московской медицинской академии (ныне Первого МГМУ) им. И.М. Сеченова МЗ РФ.
С 2003 г. возглавляет кафедру сердечно-сосудистой хирургии и интервенционной кардиологии Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова МЗ РФ.
По инициативе Л.А. Бокерия в успешно функционирует учебно-исследовательский центр «Современные медицинские технологии», который ежегодно проводит 4–6 курсов последипломного повышения квалификации специалистов высшего звена.
Л.А. Бокерия выполняет весь известный арсенал операций на сердце при самой разнообразной патологии: от 3 до 6 операций в день, то есть от 700 до 900 операций с использованием искусственного кровообращения в год.
С 1996 г. он является главным кардиохирургом МЗ РФ.
Л.А. Бокерия – автор и соавтор свыше 3700 научных публикаций, в том числе более 250 книг, более 100 изобретений и полезных моделей, более 300 программ и баз данных для ЭВМ, ряд которых зарегистрированы за рубежом, по различным проблемам сердечно-сосудистой хирургии, кардиологии, медицинского образования и организации медицинской науки.
Л.А. Бокерия принадлежат уникальные работы по теоретическому обоснованию и клиническому использованию метода гипербарической оксигенации в хирургии сердца и сосудов. Он крупнейший специалист в области диагностики и хирургического лечения нарушений ритма и проводимости сердца (особенно тахиаритмий), включая различные сочетания сердечных аритмий с врожденными и приобретенными пороками и аномалиями развития сердца, коронарной болезнью.
Л.А. Бокерия является инициатором развития и другого нового раздела кардиохирургии в нашей стране – минимально инвазивной хирургии сердца. Большой вклад внес Л.А. Бокерия в решение проблемы хирургического лечения ИБС.
Велика роль Л.А. Бокерия в разработке новых подходов к хирургическому лечению терминальной сердечной недостаточности. Его заслугой является разработка новых операций у тяжелой категории кардиохирургических больных с различными формами кардиомиопатий. Он первым развил концепцию динамической кардиомиопластики, в том числе и у детей. Л.А. Бокерия выполнил первую в нашей стране имплантацию искусственного желудочка сердца и после большого перерыва инициировал возобновление в Центре выполнения операций по трансплантации сердца.
По инициативе Л.А. Бокерия в клиническую практику внедрены передовые технологии диагностики и реконструктивной хирургии заболеваний восходящего отдела и дуги аорты.
Он генерировал развитие и другого направления современной медицинской науки – креативной кардиологии, которая определяет необходимость созидательного сотрудничества врачей разных специальностей: кардиологов, кардиохирургов, специалистов по функциональной диагностике, фундаментальным и прикладным дисциплинам.
Под руководством Л.А. Бокерия в Центре разрабатываются и внедряются в клиническую практику новые высокотехнологичные принципы профилактики и лечения больных с сердечно-сосудистой патологией – использование методов генной и клеточной терапии.
Академик Л.А. Бокерия проводит приоритетные исследования по созданию биопротезов клапанов сердца для коррекции клапанных пороков – низкопрофильного, изогнутого по плоскости биопротеза митрального и трикуспидального клапанов, воспроизводящего естественную форму фиброзного кольца, на упругоподатливом каркасе. Продолжено изучение эффективности защиты миокарда у детей первого года жизни при применении нового внутриклеточного кардиоплегического раствора «Бокерия – Болдырева», созданного в под руководством Л.А. Бокерия.
Л.А. Бокерия активно занимается методологией медицинской науки и педагогической деятельностью. Он является создателем крупнейшей в стране кардиохирургической школы, воспитавшим не одно поколение врачей – кардиохирургов, кардиологов, реаниматологов и специалистов других смежных специальностей.
Л.А. Бокерия – научный руководитель 350 кандидатских и консультант более 100 докторских диссертаций. Он создатель издательства им. А.Н. Бакулева с типографией, основатель и главный редактор журналов «Анналы хирургии», «Бюллетень им. А.Н. Бакулева «Сердечно-сосудистые заболевания», «Детские болезни сердца и сосудов», «Клиническая физиология кровообращения», «Анналы аритмологии», «Креативная кардиология», информационного сборника «Сердечно-сосудистая хирургия»; главный редактор журнала «Грудная и сердечно-сосудистая хирургия».
Активная деятельность Л.А. Бокерия и его вклад в отечественное здравоохранение отмечены званиями и премиями самого высокого достоинства. Он лауреат Ленинской премии (1976 г.), двух Государственных премий (1986 г. – СССР, 2002 г. – РФ), Премии Правительства Российской Федерации (2003 г.). За выдающиеся достижения Л.А. Бокерия награжден орденом «За заслуги перед Отечеством» III (1999 г.), II (2004 г.) и IV (2010 г.) степени, орденом Достоинства и Чести (Республика Грузия, 1999 г.), орденом Преподобного Сергия Радонежского II степени (2001 г.). Русский биографический институт неоднократно признавал Л.А. Бокерия «Человеком года», а в 2000 г. – «Человеком десятилетия» в номинации «Медицина». В 2002 г. он удостоен титула «Человек-легенда», общероссийской премии «Русский национальный Олимп», учрежденной Правительством, Союзом промышленников и фондом «Третье тысячелетие». Как одному из ведущих кардиохирургов мира в 2003 г. Л.А. Бокерия вручена международная премия «Золотой Гиппократ». В 2004 г. он удостоен премии РАН «Триумф» в номинации «Наука о жизни – медицина». В 2004 г. он отмечен наградным знаком – орденом «Меценат», который присуждается Благотворительным фондом «Меценаты столетия» за выдающийся вклад в дело возрождения и процветания мира, за величие души, за бескорыстную щедрость; в 2004 и 2005 г. – Золотым почетным знаком «Общественное признание», который присуждается Национальным фондом «Общественное признание», Национальным гражданским комитетом по взаимодействию с правоохранительными, законодательными и судебными органами и независимой организацией «Гражданское общество» за большой личный вклад в развитие отечественной медицины, проведение уникальных кардиохирургических операций с применением новейших медицинских технологий, спасших жизни сотен детей и новорожденных, многолетнюю и плодотворную научно-практическую, педагогическую и просветительскую деятельность, активную гражданскую позицию.
В 2006 г. Л.А. Бокерия награжден Почетным алмазным орденом «Общественное признание», удостоен диплома Президиума Парламента народов России «за спасение многочисленных жизней, выдающиеся знания, умение руководить, за уникальные личные качества – благородство, мужество, чувство долга, умение беречь честь и достоинство, держать слово и делать дело, в также за веру в великое будущее Отечества», Золотой медали – за выдающийся вклад в образование России и Золотой звезды «Честь, гордость и слава России».
В 2008 г. Л.А. Бокерия награжден медалью «За практический вклад в укрепление здоровья нации», Орденом Чести с присуждением звания «Опора честного бизнеса» и почетного титула «Выдающийся кардиохирург современности». В 2009 г. огромный вклад Л.А. Бокерия в науку и отечественное здравоохранение отмечен присуждением ему Премии имени А.Н. Косыгина «За большие достижения в решении проблем развития экономики России» и премии города Москвы в области медицины «за разработку и внедрение в клиническую практику нового биологического клапана «Биоглис».
Л.А. Бокерия – действительный член Американской ассоциации торакальных хирургов (1991 г.), член правления (1992 г.) и член Президиума (с 2003 г., консул) Европейского общества грудных и сердечно-сосудистых хирургов, член правления Европейского общества сердечно-сосудистых хирургов, член научного правления Международного кардиоторакального центра Монако (1992 г.), член Сербской академии наук (1997 г.), почетный член Американского колледжа хирургов (1998 г.), академик АМН Украины, почетный профессор МГУ им. М.В. Ломоносова (2011 г.), иностранный член Национальной Академии наук Грузии (2012 г.).
Он президент Ассоциации сердечно-сосудистых хирургов России (1995 г.), президент Общероссийской общественной организации «Лига здоровья нации» (2003 г.), член Общественной палаты РФ всех созывов.